大腸桿菌發(fā)酵經(jīng)驗總結及注意事項

首先，補料速率與比生長(cháng)速率直接影響著(zhù)乙酸的生成速率和積累量（主要是補料速率與比生長(cháng)速率影響發(fā)酵液中的殘糖量，進(jìn)而影響），所以適當的控制補料速率和比生長(cháng)速率，對于控制乙酸的量有很好的效果。

其次，必須要保證充足的溶氧，并嚴格控制pH值，而且補酸堿的速率盡量緩和，不能太快；溫度對于蛋白的表達也有很重要的影響，較低的發(fā)酵溫度下所生產(chǎn)出的蛋白大多是有活性的，而較高的發(fā)酵溫度下產(chǎn)生的蛋白大多一包涵體形式存在。

第三，選取合理的誘導時(shí)間非常重要，一般的誘導時(shí)間選在指數生長(cháng)后期，而且誘導時(shí)的比生長(cháng)速率最好能控制在0.2之內，選在此時(shí)誘導，1.將菌體的快速生長(cháng)期與蛋白合成期分開(kāi)，使這兩個(gè)階段互不影響，有利于蛋白的高表達；2.已經(jīng)得到了大量的菌體，而且菌體的生物量基本接近穩定，不論是從動(dòng)力學(xué)角度，還是能耗，物料成本方面，都比較合理。

第四，補料過(guò)程中的碳氮比也很重要。若氮源過(guò)高，會(huì )使菌體生長(cháng)過(guò)于旺盛，pH偏高，不利于代謝產(chǎn)物的積累，氮源不足，則菌體繁殖量少從而影響產(chǎn)量；碳源過(guò)多，則容易刑場(chǎng)較低的pH，抑制菌體生長(cháng)，碳源不足，則容易引起菌體的衰老和自溶。另外，碳氮比不當還會(huì )引起菌體按比例的吸收營(yíng)養物質(zhì)，從而直接影響菌體的生長(cháng)和產(chǎn)物的合成。
根據自己的經(jīng)驗，一般情況下，對于一個(gè)穩定的發(fā)酵工藝下，如果總是在固定的發(fā)酵時(shí)間段出現溶菌現象，而且能排除噬菌體和染菌的可能性后，那就可能是因為碳氮比不合理造成的?？梢赃m當調整碳氮比。